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X33酵母感受態細胞

簡要描述:X33酵母感受態細胞保存條件:-80℃,酵母促轉化劑:100μl -20℃,畢赤酵母轉化液:5ml,4℃。

  • 產品型號:ABG711-50
  • 產品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-06-28
  • 訪  問  量:1587

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG711-50
規格50X100ul供貨周期現貨
主要用途感受態細胞應用領域環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥

X33酵母感受態細胞操作說明:

1、取需轉化質粒5µg,酶切,回收;

2、取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預冷的線性質粒1-5µg(體積不高于15µl),酵母促轉化劑10µl,100µl冰上融化的感受態細胞,畢赤酵母轉化液500µl,輕輕翻轉混勻6-8次;

3、30℃水浴30min,每15min輕輕翻轉混勻6-8次;

4、每支加入20µl的二甲基亞砜;(用于提高轉化效率,也可不做)

5、42℃水浴15min,每7.5min輕輕翻轉混勻6-8次;

6、12000rpm瞬時離心棄上清,每支加1ml的YPGPlus(或YPG)于30℃復蘇1h;(用于提高轉化效率,也可不做)

7、12000rpm瞬時離心棄上清,用100µl 0.9%NaCl重懸,涂板,30℃培養3-7d。

X33酵母感受態細胞注意事項:

1、使用酵母促轉化劑前,請把裝有酵母促轉化劑的管子在沸水中煮沸5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃儲存備用。

2、轉化液低溫環境下會析出,請于常溫下溶解后使用。

3、轉化全程要無菌操作。

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